THINCERT® CELKWEEK INSERTS
Voor geavanceerde cel- en weefselkweektoepassingen biedt Greiner Bio-One een uitgebreide reeks membraaninserts - ThinCert®. Ze zijn verkrijgbaar in de maten 6, 12 en 24 wells en kunnen worden gecombineerd met zes verschillende membraantypes met verschillende poriegroottes en dichtheid. Ze zijn compatibel met standaard CELLSTAR® multiwell-platen voor celkweek.
ThinCert®-platen zijn geoptimaliseerd voor gebruik met ThinCert®-celkweekinserts. De diepe wellen van deze plaat maken het gebruik van een groter mediumvolume mogelijk tijdens de air-liftculture. Als gevolg hiervan zijn er minder mediumwissels nodig en wordt de hoeveelheid handmatig werk aanzienlijk verminderd. Deze zijn verkrijgbaar in formaten met 6 en 12 wells.
De ThinCert®-celkweekinserts zijn geschikt voor een breed scala aan toepassingen, waaronder:
- Transport-, secretie- en diffusiestudies
- Migratie-experimenten
- Cytotoxiciteitstesten
- Co-culturen
- Trans epitheliale elektrische weerstand (TEER) metingen
- Primaire celkweek
- Kleine poriegroottes (0,4 en 1 μm in diameter): voor onderzoek naar co-cultivatie, transport, secretie en diffusie
- Grotere poriegroottes (3 en 8 μm in diameter): voor migratie- en invasiestudies
- Transparante membranen (over het algemeen lage poriedichtheid): Geschikt voor licht- en elektronenmicroscopie. Niet geschikt voor alle toepassingen die hoge diffusiesnelheden vereisen, zoals transportstudies
- Doorschijnende membranen (over het algemeen hoge poriedichtheid): geschikt voor elektronenmicroscopie, fluorescentiemicroscopie, confocale microscopie, TEER en transportstudies
Materiaal:
ThinCert®-celkweekinserts zijn gemaakt van hoogwaardige heldere polystyreen behuizingen en polyethyleentereftalaat (PET) capillaire poriemembranen. Beide materialen, polystyreen en PET, zijn USP klasse VI gecertificeerd en compatibel met celkweek. De koppeling tussen de behuizing en het membraan wordt bereikt door middel van een geautomatiseerd proces. Dit levert een extreem sterke en robuuste afdichting op zonder het membraan op enigerlei wijze aan te tasten of te verzwakken.
De membranen ondergaan een fysieke oppervlaktebehandeling om de celhechting en groeikenmerken te optimaliseren. Alle capillaire poriën in een membraan vertonen een hoge mate van uniformiteit in diameter. Deze uniformiteit zorgt voor betrouwbare en consistente uitwisseling tussen de twee compartimenten en zorgt zo voor reproduceerbaarheid bij het uitvoeren van meerdere experimenten.
Kits:
De inserts voor celkweek zijn samen met het vereiste aantal platen voorverpakt. Het geautomatiseerde productieproces omvat een dubbele optische controle van elke geproduceerde insert, waardoor elke biologische verontreiniging wordt vermeden. De steriliteit van de per stuk verpakte inserts en multiwell-platen wordt verzekerd door bestraling.
Voor licht- of elektronenmicroscopisch onderzoek kunnen de membranen eenvoudig met een scalpel uit de behuizing worden gehaald. Zelfs wanneer het membraan is losgemaakt, blijft het membraan vlak zonder op te rollen, wat verdere stappen aanzienlijk vereenvoudigt. Vanwege de hoge chemische resistentie tegen verschillende oplosmiddelen is het membraan geschikt voor tal van celfixatieprotocollen. Door hun speciale ophanging houden de ThinCert®-celcultuur-inserts altijd een afstand tot de bodem van de well, waardoor de daar gekweekte cellen altijd beschermd zijn tegen beschadiging. Met behulp van spacers wordt altijd een veilige minimale afstand tot de zijwanden aangehouden, waardoor capillaire aanzuiging tussen de binnenwand van de well en de buitenwand van de insert wordt voorkomen. Dit betekent dat overdracht tussen de well en ThinCert® uitsluitend plaatsvindt via het poreuze membraan. ThinCert®-celkweekinserts zitten excentrisch in de wellen en verplaasten naar boven wanneer een pipet wordt ingebracht. Wanneer de pipet weer wordt verwijderd, nemen de ThinCert® automatisch hun oorspronkelijke positie weer in. Deze functie wordt self-lift geometrie genoemd.
Cell culture inserts key facts
- Hanging geometry
- Improved cell adhesion through physical surface treatment
- Simplified pipetting due to self-lift geometry
- Enhanced pipetting access and gas exchange
Belangrijkste vereisten afgeleid van de toepassing
Migratie-/invasietest
Celmigratie speelt een belangrijke rol in fysiologische en pathologische processen tijdens de embryonale ontwikkeling. Evenals wondgenezing, immuunrespons, ontsteking en tumorigenese. De filterassay is een standaard in vitromodel dat wordt gebruikt om celmigratie te bestuderen. Het wordt uitgevoerd in celkweekinserts met 8,0 μm poriën van het ThinCert®-membraan. Celmigratie vindt plaats van het bovenste compartiment naar een chemo-attractantbron in het onderste compartiment.
Co-cultuur
Co-cultuur omvat de studie van immuun celinteracties. Daarnaast omvat het andere diverse toepassingen zoals het stimuleren van celproliferatie, het handhaven van celdifferentiatie en het herstel van heterocellulaire functies in vitro (bijvoorbeeld bloed-hersenbarrière). Met ThinCert®-celkweekinserts kunnen cellen in het bovenste en onderste compartiment worden aangebracht. De poriën van 0,4 µm of 1,0 µm van het ThinCert®-membraan maken de uitwisseling van moleculen tussen de twee celpopulaties mogelijk.
Transport Studies
Transportstudies behoren tot de meest voorkomende toepassingen van inserts voor celkweek. Het doel is om een functioneel epitheel te reconstrueren uit individuele cellen. Daarnaast zal een actief transport van stoffen van het ene compartiment door het epitheel naar het andere compartiment worden onderzocht. ThinCert®-celkweekinserts met poriën van 0,4 µm en doorschijnende membranen worden aanbevolen voor transportassays.
Organotypische en air-lift-culture
Bij organotypische kweek kan een weefsel gedurende langere tijd in leven worden gehouden. Terwijl bij weefselreconstructie het weefsel de novo wordt gegenereerd uit afzonderlijke cellen. Beide procedures maken gebruik van inserts voor celkweek met poriën van 0,4 tot 3,0 µm. De weefselgroei in vitro op het lucht-vloeistof-grensvlak zonder beperkingen door gasuitwisseling. Bovendien dient voor sommige weefseltypen de directe blootstelling van de gekweekte cellen aan de omringende atmosfeer als een onmisbare differentiatiestimulus.
3D-celkweek opent de deur naar nieuwe onderzoeksmogelijkheden
Celbiologisch onderzoek en celgebaseerde screening maken een spannende ontwikkeling door; brede acceptatie van 3D-celcultuur. Wij van Greiner Bio-One zijn er erg enthousiast over en willen met u graag de methoden en technieken delen die resultaten opleveren.
product overzicht
Verwante Documenten
IFU gebruiksinstructies /
Wetenschappelijke publicaties / PDF, 318 KB
Wetenschappelijke publicaties / PDF, 620 KB
IFU gebruiksinstructies /
IFU gebruiksinstructies /
IFU gebruiksinstructies / PDF, 192 KB / 781840, 781841
IFU gebruiksinstructies /