Cristallographie

Une méthode reconnue pour la détermination des structures protéiques est l’analyse aux rayons X des cristaux. La détermination de la structure tri-dimensionnelle des protéines a contribué à des avancées majeures en recherche fondamentale, plus particulièrement en génomiques structurales et en pharmaceutique. La méthode la plus couramment utilisée pour la cristallisation des protéines est la diffusion de vapeur, laquelle intègre les méthodes de goutte assise et de goutte suspendue. Une goutte de solution protéine est mélangée avec une goutte de solution réactif, toutes deux incubées avec un volume important de solution réactif dans un puits scellé. Les gradients de concentration entre la goutte échantillon et la solution du réservoir s’équilibrent par diffusion, ce qui induit le processus de cristallisation si toutes les conditions sont réunies.

La méthode microbatch, où la goutte échantillon est recouverte avec de l’huile, est également très répandue. Dans cette technique, le choix de l’huile détermine le taux de diffusion de l’eau dans la goutte échantillon à travers l’huile.
De nombreux facteurs affectent la cristallisation des protéines. Comme les conditions optimales de cristallisation ne peuvent généralement être prédites, un grand nombre de tentatives est souvent nécessaire pour déterminer et optimiser les conditions appropriées. La cristallisation de protéines représente donc encore un frein majeur dans l’analyse structurale. L’utilisation des technologies à haut débit, tels que les robots de pipetage et les microplaques standardisées, permet de tester un nombre important de conditions de cristallisation en un temps court et avec relativement peu de protéines.

La gamme CrystalStar™ Greiner Bio-One réunit les plaques de cristallisation et les accessoires destinés spécifiquement pour la cristallisation haut débit.